Metoda ekstrakcije
V petdesetih in šestdesetih letih prejšnjega stoletja so številne države po svetu, vključno s Kitajsko, pridobivale peptide predvsem iz živalskih organov.Na primer, injekcijo timozina pripravimo tako, da zakoljemo novorojeno tele, odstranimo njegov timus in nato uporabimo biotehnologijo oscilacijske separacije za ločevanje peptidov iz timusa teleta.Ta timozin se pogosto uporablja za uravnavanje in izboljšanje delovanja celične imunosti pri ljudeh.
Naravni bioaktivni peptidi so zelo razširjeni.Živali, rastline in morski organizmi v naravi vsebujejo veliko bioaktivnih peptidov, ki opravljajo različne fiziološke funkcije in vzdržujejo normalne življenjske aktivnosti.Ti naravni bioaktivni peptidi vključujejo sekundarne metabolite organizmov, kot so antibiotiki in hormoni, ter bioaktivne peptide, prisotne v različnih sistemih tkiv.
Trenutno je veliko bioaktivnih peptidov izoliranih iz človeških, živalskih, rastlinskih, mikrobnih in morskih organizmov.Vendar se bioaktivni peptidi na splošno nahajajo v majhnih količinah v organizmih in trenutne tehnike za izolacijo in čiščenje bioaktivnih peptidov iz naravnih organizmov niso popolne, z visokimi stroški in nizko bioaktivnostjo.
Običajno uporabljene metode za ekstrakcijo in ločevanje peptidov vključujejo soljenje, ultrafiltracijo, gelsko filtracijo, izoelektrično točkovno obarjanje, ionsko izmenjevalno kromatografijo, afinitetno kromatografijo, adsorpcijsko kromatografijo, gelsko elektroforezo itd. Njegova glavna pomanjkljivost je zapletenost delovanja in visoki stroški.
Kislinsko-bazična metoda
Kislinska in alkalna hidroliza se večinoma uporabljata v eksperimentalnih ustanovah, redko pa se uporabljata v proizvodni praksi.V procesu alkalne hidrolize beljakovin se večina aminokislin, kot sta serin in treonin, uniči, pride do racemizacije in izgube velikega števila hranil.Zato se ta metoda redko uporablja v proizvodnji.Kislinska hidroliza proteinov ne povzroči racemizacije aminokislin, hidroliza je hitra in reakcija končana.Vendar pa so njegove slabosti zapletena tehnologija, težaven nadzor in resno onesnaževanje okolja.Porazdelitev molekulske mase peptidov je neenakomerna in nestabilna, njihove fiziološke funkcije pa je težko določiti.
Encimska hidroliza
Večino bioaktivnih peptidov najdemo v dolgih verigah beljakovin v neaktivnem stanju.Pri hidrolizaciji s specifično proteazo se njihov aktivni peptid sprosti iz amino sekvence proteina.Encimska ekstrakcija bioaktivnih peptidov iz živali, rastlin in morskih organizmov je bila v zadnjih desetletjih v središču raziskav.
Encimska hidroliza bioaktivnih peptidov je izbira ustreznih proteaz z uporabo proteinov kot substratov in hidroliziranjem proteinov za pridobitev velikega števila bioaktivnih peptidov z različnimi fiziološkimi funkcijami.V proizvodnem procesu so temperatura, vrednost PH, koncentracija encima, koncentracija substrata in drugi dejavniki tesno povezani z učinkom encimske hidrolize majhnih peptidov, ključna pa je izbira encima.Zaradi različnih encimov, ki se uporabljajo za encimsko hidrolizo, izbire in formulacije encimov ter različnih virov beljakovin se nastali peptidi zelo razlikujejo po masi, porazdelitvi molekulske mase in sestavi aminokislin.Običajno izberemo živalske proteaze, kot sta pepsin in tripsin, in rastlinske proteaze, kot sta bromelain in papain.Z razvojem znanosti in tehnologije ter nenehnimi inovacijami tehnologije bioloških encimov bo odkritih in uporabljenih vedno več encimov.Encimska hidroliza se pogosto uporablja pri pripravi bioaktivnih peptidov zaradi svoje zrele tehnologije in nizkih naložb.
Čas objave: 30. maj 2023